Ш 65 Шишлова-Соколовская, А. М. Разработка CRISPR/Cas9 системы для геномного редактирования гена NtPDS табака (Nicotiana Tabacum) [] / А. М. Шишлова-Соколовская, Е. П. Хмилевская, О. Ю. Урбанович // Молекулярная и прикладная генетика : сборник научных трудов / Государственное научное учреждение "Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси". - Минск, 2022. - Т. 33. - С. 47-57 : рис. - Библиогр. в конце ст.
Кл.слова (ненормированные): ТАБАК -- НАРКОТИЧЕСКИЕ РАСТЕНИЯ -- NICOTIANA TABACUM -- NICOTIANA -- ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ -- ГЕНОМЫ -- РЕДАКТИРОВАНИЕ ГЕНОМОВ -- МЕТОД CRISPR-CAS -- ВЕКТОРЫ -- PCR -- ПЦР -- МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ -- СЕКВЕНИРОВАНИЕ ДНК -- СЕКВЕНИРОВАНИЕ -- БИОИНФОРМАТИКА -- ИНФОРМАТИКА -- ИССЛЕДОВАНИЯ -- БЕЛАРУСЬ -- СТРАНЫ МИРА -- 23-05 Аннотация: CRISPR/Cas9 система является одним из мощнейших инструментов для редактирования геномов растений. В представленном исследовании векторные конструкции, разработанные на основе CRISPR/Cas9 системы, были использованы для редактирования генома Nicotiana tabacum. В качестве мишени выбран ген NtPDS, кодирующий фермент 15-цис-фитоендесатуразу. Нокаут данного гена в растениях приводит к фенотипу альбиносов и карликовости. С помощью биоинформатических платформ in silico было смоделировано 3 векторные конструкции на основе бинарного вектора pRGEB31:pRGEB31 + gRNA5-pds, pRGEB31 + gRNAJp2-pds, pRGEB31 + gRNADeT186-pds, несущие в своем составе систему CRISRP/Cas9 со спейсерами к различным участкам структурных доменов гена NtPDS. Векторные конструкции были собраны, используя методы молекулярного клонирования. Правильность и корректность их сборки подтверждена методом секвенирования по Сэнгеру. Посредством Agrobacterium-опосредованной трансформации листовых дисков данные генетические конструкции были введены в геном модельного объекта N. tabacum cv. Petit Havana SR1. В процессе культивирования листовых дисков табака удалось инициировать процессы каллусогенеза и морфогенеза при использовании каждого из вариантов конструкций, однако максимальная их частота наблюдалась при использовании конструкции pRGEB31 + gRNA5-pds. Доп.точки доступа: Хмилевская, Е. П.; Урбанович, О. Ю.; Государственное научное учреждение "Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси" Имеются экземпляры в отделах: всего 1 : ОКД/57 (1) Свободны: ОКД/57 (1) |