Вид документа : Статья из сборника (выпуск продолж. издания) Шифр издания : 633.71/Ш 65 Автор(ы) : Шишлова-Соколовская А. М., Хмилевская Е. П., Урбанович О. Ю. Заглавие : Разработка CRISPR/Cas9 системы для геномного редактирования гена NtPDS табака (Nicotiana Tabacum) Коллективы : Государственное научное учреждение "Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси" Место публикации : Молекулярная и прикладная генетика: сборник научных трудов/ Государственное научное учреждение "Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси". - Минск, 2022. - Т. 33. - С. 47-57: рис. (Шифр Ж 526/2022/33) Примечания : Библиогр. в конце ст. УДК : 633.71 + 631.523 + 577.21 + 602.6 Ключевые слова (''Своб.индексиров.''): табак--наркотические растения--nicotiana tabacum--nicotiana--генная инженерия--геномы--редактирование геномов--метод crispr-cas--векторы--pcr--пцр--молекулярно-генетические методы--секвенирование днк--секвенирование--биоинформатика--информатика--исследования--беларусь--страны мира--23-05 Аннотация: CRISPR/Cas9 система является одним из мощнейших инструментов для редактирования геномов растений. В представленном исследовании векторные конструкции, разработанные на основе CRISPR/Cas9 системы, были использованы для редактирования генома Nicotiana tabacum. В качестве мишени выбран ген NtPDS, кодирующий фермент 15-цис-фитоендесатуразу. Нокаут данного гена в растениях приводит к фенотипу альбиносов и карликовости. С помощью биоинформатических платформ in silico было смоделировано 3 векторные конструкции на основе бинарного вектора pRGEB31:pRGEB31 + gRNA5-pds, pRGEB31 + gRNAJp2-pds, pRGEB31 + gRNADeT186-pds, несущие в своем составе систему CRISRP/Cas9 со спейсерами к различным участкам структурных доменов гена NtPDS. Векторные конструкции были собраны, используя методы молекулярного клонирования. Правильность и корректность их сборки подтверждена методом секвенирования по Сэнгеру. Посредством Agrobacterium-опосредованной трансформации листовых дисков данные генетические конструкции были введены в геном модельного объекта N. tabacum cv. Petit Havana SR1. В процессе культивирования листовых дисков табака удалось инициировать процессы каллусогенеза и морфогенеза при использовании каждого из вариантов конструкций, однако максимальная их частота наблюдалась при использовании конструкции pRGEB31 + gRNA5-pds. Доп.точки доступа: Хмилевская, Е. П.; Урбанович, О. Ю.; Государственное научное учреждение "Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси"