К 72 Костеневич, А. А. Клонирование гена ß-галактозидазы Arthrobacter sulfonivorans в клетках Escherichia coli / А. А. Костеневич, Л. И. Сапунова, А. Г. Лобанок> // Микробные биотехнологии: фундаментальные и прикладные аспекты : сборник научных трудов / Национальная академия наук Беларуси, ГНПО "Химический синтез и биотехнологии", Институт микробиологии, Белорусский республиканский фонд фундаментальных исследований, Белорусское общественное объединение микробиологов. - Минск : Беларуская навука, 2014. - Т. 6. - С. 51-62
Кл.слова (ненормированные): ГАЛАКТОЗИДАЗЫ -- ГЛИКОЗИДАЗЫ -- ГИДРОЛИЗ -- ЛИЗИС -- ESCHERICHIA -- ESCHERICHIA COLI -- БАКТЕРИИ -- ФЕРМЕНТЫ -- БЕЛКИ -- КЛОНИРОВАНИЕ ДНК -- МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ Аннотация: Оптимизированы условия гидролиза предварительно выделенной и очищенной геномной ДНК бактерий Arthrobacter sulfonivorans ЛФ-ГАЛ (БИМ В-499-Д) – продуцента внеклеточной β-галактозидазы. С использованием рестрикционной эндонуклеазы Sau3AI выделены и встроены в вектор pRSET B фрагменты ДНК размером 4000–6000 п. о., которые соответствуют размеру генов бактериальных β-галактозидаз. Гибридные векторы pRSET B методом электропорации клонированы в клетках бактерий Escherichia coli DH5α. В результате отбора на селективной среде, содержащей ампициллин, изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид и 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид, выявлено 10 позитивных по β-галактозидазной активности клонов E. coli DH5α. Установлено, что в условиях глубинного культивирования отобранные рекомбинанты синтезируют каталитически активный ферментный белок, по электрофоретической подвижности идентичный β-галактозидазе штамма Arthro-bacter sulfonivorans ЛФ-ГАЛ (БИМ В-499-Д) –донора клонированного гена. Доп.точки доступа: Сапунова, Л. И.; Лобанок, А. Г.; Национальная академия наук Беларуси; ГНПО "Химический синтез и биотехнологии"Институт микробиологии; Белорусский республиканский фонд фундаментальных исследований; Белорусское общественное объединение микробиологов Имеются экземпляры в отделах: всего 1 : ОКД/57 (1) Свободны: ОКД/57 (1) |