Вид документа : Статья из сборника (выпуск продолж. издания) Шифр издания : 577.15/К 72 Автор(ы) : Костеневич А. А., Сапунова Л. И., Лобанок А. Г. Заглавие : Клонирование гена ß-галактозидазы Arthrobacter sulfonivorans в клетках Escherichia coli Коллективы : Национальная академия наук Беларуси, ГНПО "Химический синтез и биотехнологии", Институт микробиологии, Белорусский республиканский фонд фундаментальных исследований, Белорусское общественное объединение микробиологов Место публикации : Микробные биотехнологии: фундаментальные и прикладные аспекты: сборник научных трудов/ Национальная академия наук Беларуси, ГНПО "Химический синтез и биотехнологии", Институт микробиологии, Белорусский республиканский фонд фундаментальных исследований, Белорусское общественное объединение микробиологов. - Минск: Беларуская навука, 2014. - Т. 6. - С. 51-62 (Шифр Ж 963/2014/6) УДК : 577.15 + 579.85 Ключевые слова (''Своб.индексиров.''): галактозидазы--гликозидазы--гидролиз--лизис--escherichia--escherichia coli--бактерии--ферменты--белки--клонирование днк--молекулярно-генетические методы Аннотация: Оптимизированы условия гидролиза предварительно выделенной и очищенной геномной ДНК бактерий Arthrobacter sulfonivorans ЛФ-ГАЛ (БИМ В-499-Д) – продуцента внеклеточной β-галактозидазы. С использованием рестрикционной эндонуклеазы Sau3AI выделены и встроены в вектор pRSET B фрагменты ДНК размером 4000–6000 п. о., которые соответствуют размеру генов бактериальных β-галактозидаз. Гибридные векторы pRSET B методом электропорации клонированы в клетках бактерий Escherichia coli DH5α. В результате отбора на селективной среде, содержащей ампициллин, изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид и 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид, выявлено 10 позитивных по β-галактозидазной активности клонов E. coli DH5α. Установлено, что в условиях глубинного культивирования отобранные рекомбинанты синтезируют каталитически активный ферментный белок, по электрофоретической подвижности идентичный β-галактозидазе штамма Arthro-bacter sulfonivorans ЛФ-ГАЛ (БИМ В-499-Д) –донора клонированного гена. Доп.точки доступа: Сапунова, Л. И.; Лобанок, А. Г.; Национальная академия наук Беларуси; ГНПО "Химический синтез и биотехнологии"Институт микробиологии; Белорусский республиканский фонд фундаментальных исследований; Белорусское общественное объединение микробиологов