Воронкова, Е. В. Методы молекулярно-генетического анализа для оценки потенциальной токсичности и аллергенности белковых продуктов трансгенов генно-инженерных растений (на примере ГМ-картофеля, устойчивого к колорадскому жуку) : методические рекомендации / Е. В. Воронкова, В. И. Лукша, А. П. Ермишин ; ред. А. П. Ермишин ; рец.: С. Е. Дромашко, М. Г. Синявская ; Национальная академия наук Беларуси, Государственное научное учреждение "Институт генетики и цитологии HAH Беларуси". - Минск : Право и экономика, 2014. - 71 с. : рис. - Библиогр.: с. 71. - ISBN 978-985-552-352-0 : Б. ц. Содержание: ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОТЫ . - С .11- Оборудование и материалы, применяемые при проведении анализа . - С .13-17 Химические реактивы для приготовления рабочих и запасных растворов и реактивы для молекулярно-генетического анализа . - С .17-19 Приготовление рабочих растворов для выделения и очистки ДНК и РНК . - С .20-21 Приготовление рабочих растворов для электрофореза в агарозном геле . - С .21-22 ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА ДНК И РНК. ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ВЫДЕЛЕНИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ . - С .22 Подготовка растительного материала для получения препаратов ДНК . - С .22-23 Выделение и очистка ДНК картофеля с помощью "Genomic DNA Purification Kit" производства фирмы "Thermo Scientific" . - С .23 Подготовка к работе . - С .23-24 Порядок работы по выделению и очистке препаратов ДНК . - С .25-26 Выделение и очистка РНК картофеля с помощью набора "Total RNA Purification from Plant (NucleoSpin® RNA Plant" производства фирмы "Machery-Nagel" . - С .27 Подготовка растительного материала для получения препаратов РНК . - С .27-28 Подготовка к работе . - С .28-29 Порядок работы при выделении и очистке препаратов РНК с помощью набора "Total RNA Purification from Plant (NucleoSpin RNA Plant") . - С .29-32 Определение концентрации и оценка качества (активности) препаратов ДНК, РНК и кДНК . - С .32-33 Определение концентрации и оценка качества (чистоты) препаратов ДНК, РНК и кДНК на спектрофотометре . - С .33-34 Определение концентрации и оценка качества (активности) препаратов ДНК и РНК с помощью электрофореза в агарозном геле . - С .34-39 ПОЛУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ К-ДНК . - С .39 Порядок работы по получению препаратов кДНК с использованием стандартных наборов "Thermo Scientific RevertAid Н Minus First Strand CDNA Synthesis Kit" . - С .39-41 ПОДБОР ПРАЙМЕРОВ ДЛЯ СИНТЕЗА ФРАГМЕНТОВ К-ДНК, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ АНАЛИЗА НУКЛЕОТИДНОЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ЭКСПРЕССИРУЕМОЙ ЧАСТИ ВСТРОЕННЫХ ГЕНОВ . - С .41-48 ОЧИСТКА АМПЛИФИЦИРОВАННЫХ ФРАГМЕНТОВ кДНК . - С .48-49 Порядок работы по очистке амплифицированных фрагментов кДНК из агарозного геля . - С .49-52 ПОДГОТОВКА ПРЕПАРАТОВ АМПЛИФИЦИРОВАННЫХ ФРAГМЕHTOB К-ДНК ДЛЯ СЕКВЕНИРОВАНИЯ С ПОМОЩЬЮ АВТОМАТИЧЕСКОГО АНАЛИЗАТОРА . - С .52-54 КОМПЬЮТЕРНЫЙ АНАЛИЗ ДАННЫХ СИКВЕНСА . - С .54-57 АНАЛИЗ СООТВЕТСТВИЯ ПРОДУКТОВ ЭКСПРЕССИИ ВСТРОЕННОГО ГЕНА СВЕДЕНИЯМ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ НУКЛЕОТИДОВ ТРАНСГЕНА, ПРЕДОСТАВЛЕННЫХ ЗАЯВИТЕЛЕМ . - С .57-62 ОЦЕНКА ГОМОЛОГИИ АМИНОКИСЛОТНЫХ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ - ПРОДУКТОВ ТРАНСГЕННОЙ ВСТАВКИ С АМИНОКИСЛОТНЫМИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЯМИ ИЗВЕСТНЫХ БЕЛКОВ-АЛЛЕРГЕНОВ И БЕЛКОВ-ТОКСИНОВ . - С .62-71
Кл.слова (ненормированные): ТРАНСГЕННЫЕ РАСТЕНИЯ -- ГМО -- ДНК -- РНК -- НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ -- МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ -- МЕТОДЫ -- БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА -- КАРТОФЕЛЬ -- КЛУБНЕПЛОДНЫЕ КУЛЬТУРЫ -- УСТОЙЧИВОСТЬ К ВРЕДИТЕЛЯМ -- КОЛОРАДСКИЙ ЖУК -- LEPTINOTARSA DECEMLINEATA -- LEPTINOTARSA -- ИССЛЕДОВАНИЯ Аннотация: Описание последовательности действии при осуществлении молекулярно-генетического анализа структуры белков трансгенных растений, кодируемых встроенными генами, и их соответствия известным последовательностям аминокислот. Это дает возможность исследователям собрать информацию о структуре экспрессируемых протеинов, являющихся продуктами трансгенов, что имеет ключевое значение при оценке их биобезопасности. Использование методики позволяет провести предварительную оценку аллергенности и токсичности продуктов трансгенов, достаточную для оформления досье, предназначенных для получения разрешения на высвобождение трансгенных растений в окружающую среду для проведения испытаний. Доп.точки доступа: Лукша, В. И.; Ермишин, А. П.; Ермишин, А. П. \ред.\; Дромашко, С. Е. \рец.\; Синявская, М. Г. \рец.\; Национальная академия наук Беларуси; Государственное научное учреждение "Институт генетики и цитологии HAH Беларуси" Экземпляры всего: 2 ХР (2) Свободны: ХР (2) |